Diagnóstico y caracterización molecular de Mycosphaerella fijiensis mediante la técnica de amplificación aleatoria de polimorfismos (RAPD) y análisis de regiones transcriptos internos (ITS´s) Diagnóstico y caracterización molecular de Mycosphaerella fijiensis mediante la técnica de amplificación aleatoria de polimorfismos (RAPD) y análisis de regiones transcriptos internos (ITS´s)

Abstract

A partir de la lámina foliar se obtuvieron 12 aislamientos de Mycosphaerella fijiensis provenientes de zonas plataneras y bananeras de Colombia, estableciendo cultivos monospóricos para purificar y evitar sobrelapamientos del hongo. Se extrajo el ADN a partir del micelio y tejido foliar infectado mediante el protocolo de Goodwin & Lee y Gilbertson & Dellaporta, obteniendo un ADN de buena calidad. Se amplificó la región ITS mediante iniciadores universales y específicos mostrando productos de amplificación de 233 pb para ITS A (iniciador 1 + iniciador 2), una banda de 360 pb para el ITS B (iniciador 3 + iniciador 4), una banda de 593 pb para el ITS C (iniciador 1 + iniciador 4) y un amplificado de 1080 pb con la combinación del iniciador específico MF 137 y R635. A la vez, se determinó la variabilidad genética por la técnica de RAPD´s generando productos de amplificación entre 280 pb – 2115 pb y bandas comunes entre los aislamientos obtenidos. Se determinó una similaridad genética de los aislamientos de Norte de Santander y el aislamiento de Mérida en un 70% con respecto a los de Santander, Antioquía con un 48% y 35% respectivamente.

Palabras clave: ITS´s, Mycosphaerella fijiensis, RAPD, Sigatoka negra, cultivos monospóricos