Extracción y purificación del adn de moniliophthora roreri hongo que ataca el cacao, en norte de santander
Extracción y purificación del adn de moniliophthora roreri hongo que ataca el cacao, en norte de santander
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Esta investigación tuvo como objetivo definir la metodología de extracción de ADN y purificación para Moniliophthora roreri y aplicarla a 56 aislamientos de Moniliophthora roreri obtenidos en los municipios y corregimientos de Cúcuta, Agua Clara, Sardinata, El Tarra, Tibú, Bucarasica, Teorama y El Zulia del departamento de Norte de Santander (Colombia). Se realizó la extracción de ADN, utilizando el protocolo propuesto por Miranda y Sandoval en el año 2000 con algunas modificaciones propuestas por Rocha. Para su purificación se utilizó fenol cloroformo. Una vez se estandarizó el protocolo de extracción, se probó con otros hongos: Metarhizium sp, Botritys cincrea, Fusarium culmorum, Phytophthora cinnamomi. Con este trabajo se pretende continuar con la investigación en el área de Biología Molecular de Moniliophthora roreri y otros fitopatógenos de importancia económica para la región, fomentando así la investigación.
Palabras Clave: Moniliophthora roreri; biología molecular; aislamiento de ADN; fitopatógeno
ABSTRACT
This research has as objetive to define the methodology of extraction and purification for Moniliophthora roreri and to apply it to 56 isolations of Moniliophthora roreri obtained from Cúcuta, Agua Clara, Sardinata, El Tarra, Tibú, Bucaracica, Teorama and Zulia in Norte de Santander (Colombia). The extraction of DNA was carried out by the protocol proposed by Miranda and Sandoval in 2000, with some proposed modifications by Rocha. To its purification was utilized Chloroform Phenol. Once, it was standarized by the protocol of extraction. It tested with other mushrooms: Metarhizium sp, Botritys cincrea, Fusarium culmorum, Phytophthora cinnamomi. This work intends to continue with the research in the area of Molecular Biology of Moniliophthora roreri and other phytopathogens of economic importance for the region, it promotes the research in micology.
Key words: Moniliophthora roreri, Molecular Biology, Isolation of DNA, Phytopathogen.
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ANDEBRHAN, T.; FIGUEIRA, A.; YAMADA, M.; CASCARDO, J.; FURTEK, D. 1999. Molecularfingerprinting suggests two primary out breaks of witches ́broom disease (Crinipellis perniciosa) of Theobroma cacao in Bahia, Brazil. European Journal of plant Pathology. 105: 167-175 p.
BARÓ, Y. 1998. Caracterización molecular de hongos entomopatógenos. Fitosanidad Vol 2, No. 1 y 2, junio, 67-70 p.
BOEHM, E. W. Fungal Genomic DNA Extraction. (Consultada: diciembre de 1999) www.protocolonline.net/molbio/DNA/fungal- genomic-dna-extraction.htm
DELLAPORTA, S.L.; WOOD, J.; HICKS, J.B. 1983. A plant molecular DNA minipreparation, version II, Plant Mol. Biol. Rep. 1:12-21.
DU TEAU, N.M. ; LESLIE, J. F A simple, rapid procedure for isolation of DNA for PCR from Gibberella fujikuroi.(Consultada: diciembre de 1999) www.protocolonline.net/molbio/DNA/simple-rapid-dna-extraction.htm
IBEÁS, J. I. 2003. Extracción de ADN de Fusarium sp.Universidad Pablo de Olavide,.
ROCHA, P. 2002. Teoría y práctica para la extracción y purificación del ADN de palma de Aceite. Palmas,vol 23, No. 3, 9-17 p.
ROCHA, P. 2005. Cenipalma. Comunicación personal. Bogotá.
MIRANDA, E., y SANDOVAL, L. 2000. Desarrollo de un método rápido y sencillo para el aislamiento de DNA de especies fúngicas que afectan el arroz y el tabaco. Fitosanidad vol 4, no. 1-2, marzo-junio. 107-108 p.
MÖLLER, E.M; BAHNWEG, G; SANDERMANN, H;GEIGER, H. 1992. A simple and Efficient protocol for isolation of high molecular weight DNA from filamentous fungi, fruti bodies, and infected plant tisúes. Nucleic Acids Research, vol.20, No. 22. 6115-6116p.
GOTSCH, N. 1997. Cocoa Biotechnology: status,contrainsts and future prospects. Biotechnology Advances, vol 15, No. 2. 333-352 p.
RODRÍGUEZ, S. M.; LÓPEZ, J. A.; ORTEGA, M. A;ÁNGEL, J. E. 2004. Caracterización de aislamientos obtenidos a partir de muestras de arroz con síntomas del añublo de la vaina provenientes de los llanos orientales de colombia. ICA.
SAMBROOK, J.; RUSELL, D.; 2001. Molecular Cloning, 3rd ed. Cold Spring Harbor laboratory, New York.
SUÁREZ, L. 2004. Aislamiento e identificación del hongo Moniliophthora roreri a partir de cultivos de cacao ubicados en Norte de Santander- Colombia.Universidad Pablo de Olavide. Trabajo de Investigación. Sevilla, España.